2013年自考生物化学复习资料（6）

　　26、温度对酶作用的影响：最适宜温度35―40.在到达最适宜温度之前，反应水温度的升高而加快。60以上即失去活性。

　　不可逆抑制作用：抑制剂与酶的结合后不能用透析等方法除去抑制剂二恢复酶活力。可逆抑制作用可分为竞争性和非竞争性，Km和最大反应速度的变化。米氏公式：V = Vmax[S] / Km+[S] 式中Vmax为最大速度，[S]为底物浓度，Km为米氏常数，V是在不同[S]时的反应速度。推导基于这样的假设：(1)测定的反应速度为初速度，即反应刚刚开始，产物的生成量极少，逆反应可不予考虑 (2)[S]超过[E] ，[S]的变化在测定初速度的过程中可忽略不计。竞争性抑制剂存在时，改变Km而不改变Vmax的作用。非竞争性抑制剂存在时，最大反应速度变小，而Km值不变。

　　27、变构酶：具有变构效应的酶。有些酶除了活性中心外，还有一个或几个部位，当特异性分子非共价地结合到这些部位时，可改变酶的构象，进而改变酶的活性，酶的这种调节作用称为变构调节。

　　28、举例说明竞争性抑制的特点及实际意义。有时别构酶的活性可以被低浓度的竞争性抑制剂激活，请解释?

　　竞争性抑制剂的特点：(1)抑制剂以非共价键与酶结合，用超滤、透析等物理方法能够解除抑制;(2)抑制剂的结构与底物结构相似，可与底物竞争酶的活性中心;(3)抑制剂使反应速度降低，Km值增大，但对Vmax并无影响，(4)增加底物浓度可降低或解除对酶的抑制作用。

　　竞争性抑制作用的原理可用来阐明某些药物的作用原理和指导新药合成。例如某些细菌以对氨基苯甲酸、二氢喋呤啶及谷氨酸为原料合成二氢叶酸，并进一步生成四氢叶酸，四氢叶酸是细菌核酸合成的辅酶。磺胺药物与对氨基苯甲酸结构相似，是细菌二氢叶酸合成酶的竞争性抑制剂。它通过降低菌体内四氢叶酸的合成能力，阻碍核酸的生物合成，抑制细菌的繁殖，达到抑菌的作用。

　　29、酶分离提纯：考虑较少酶活性损失，全部操作在0-5间进行，有时需要在抽取溶剂中加入少量EDTA螯合剂一方重金属使酶失活。对于巯基酶需在抽提剂中加入少量的巯基乙醇，以防止酶蛋白由于巯基被氧化而失活。在整个分离提纯过程中不能过度的搅拌，以免产生大量的气泡而使酶变性。在分离纯化过程中，必须经常测定酶的比活性，以指导纯化工作正确进行。

　　30、蔗糖的水解主要通过蔗糖合成酶与UDP反应生成果糖和尿苷二磷酸葡萄糖，可逆。蔗糖酶可催化蔗糖水解成葡萄糖和果糖。不可逆。

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