2014年自考生物制药学重点知识问答:固定化酶反应的特性变化
更新时间:2014-10-13 10:58:49
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固定化酶反应的特性变化
(l)酶活力的改变:由于酶的空间构象发生改变或因载体的空间障碍,以及底物和产物进出载体的扩散阻力的影响,从而酶经固定化后活力通常比游离酶低,催化的专一性也可能改变。
(2)稳定性提高:由于酶分子的基团与载体发生了多点连接,使酶蛋白质结构变得更稳定,因而提高了对酸、碱、化学试剂和热的稳定性。
(3)最适作用温度的改变:酶反应的最适温度是酶催化反应速率与酶失活速率的综合反映。酶经固定化后,稳定性堤两,失活速率降低,最后使最适酶反应温度上升。
(4)最适pH的改变:因为固定化载体的基团所带电荷随之变化,加上载体疏水性的不同,因而使微环境下底物浓度与主体溶液中的浓度产生差异,最终使酶反应速率改变,因此使最适pH改变。
(5)反应动力学常数的改变:由于固定化酶分子局限于固定空间内,底物需通过外部和内部扩散进入载体内才能与酶分子复合催化,生成的产物同样需通过内部和外部扩散回到液相主体,因而有扩散限制反应速率的问题。对应的米氏方程的Km和Vmax称之为表观值,这两个值与游离酶的Km和Vmax是不相等的。
(6)相对酶活力与半衰期:经固定化操作往往使酶活力受损失,单位质量酶蛋白固定化酶与游离酶活力的比值就称为相对酶活力;而固定化酶活力在催化过程其活力下降至初始活力的50%时所经过的时间被称作半衰期。这两个指标是衡量酶固定化工艺优劣的最重要的技术和经济指标。
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